细胞程序降温仪也叫XY程序降温仪,程序冷冻仪,胚胎冷冻仪,是实现生物样本低温冻存的关键设备。在常温样本需要向液氮低温环境转移时,可以介导生物样本的降温过程。广泛应用在干细胞移植、脐血冻存、眼角膜、心脏瓣膜、皮肤等器官组织的低温保存等领域,并正在向低温材料学科和农牧领域扩展。
样品冻存过程中,降温速率是影响细胞复苏活性的关键因素:过快/过慢都会对细胞造成损伤以致影响复苏活性。降温速度过快时,细胞内的水迅速结晶,冰晶会对细胞造成内部损伤;如果降温速度过慢,细胞外的水先结冰,会在细胞内外产生渗透压,会造成细胞脱水,降低细胞复苏率。针对这些问题,可通过细胞程序降温仪对降温速率的“精细控制”轻松解决——降温的不同阶段,采用不同的降温速率,可有效减少细胞损伤,提高复苏率。
原理:生物样品在降温冷冻过程中,当由液态向固态变化的相变期内会释放一定热量,使其温度回升,不控制降温速率的冷冻过程将会导致组织细胞死亡。准确地测定生物样品的相变点, 用微机编制降温程序,以便在样品相变时加大液氮输入量,克服相变样品温度的回 升,使细胞安全而迅速地度过相变期,这是提高被冻样品成活率的关键环节。
主要操作步骤包括:将细胞顺序放入一系列逐渐增加保存剂浓度的溶液中梯度脱水,置入程序降温仪快速降温至-6℃植冰(人工诱导冰晶形成),然后缓慢降温至-30℃~-80℃后液氮贮存。
注重点:在利用降温仪降温过程中,程序控制温度下降速率越均匀,温度,准确度越好,这样精种胚胎等样品成活率越高,理论上选择降温到-80度后基本平稳,然后直接放入液氮或者深冷超低温冰箱保存,当然在经费足够情况下也可以选择直接降温到-180度的设备,这样程序降温到-180度的样品成活率相对更高。